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博科小知識(shí)-浮游菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
發(fā)布日期:2023/1/4 9:41:24
1.取樣前準(zhǔn)備工作
1.1 依據(jù)檢測(cè)區(qū)域的取樣點(diǎn)數(shù),按照《培養(yǎng)基配制、滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作程序》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
1.2 在超凈工作臺(tái)內(nèi),以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15ml的裝量分裝,待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。
1.3 將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30~35℃培養(yǎng)48小時(shí)。取出逐個(gè)檢查,確認(rèn)無菌落數(shù)后即可使用。
1.4 采樣:將上述制備好的營養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣。
2.儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
2.1 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
2.1.2 浮游菌采樣器
2.1.3 培養(yǎng)皿(φ90mm×15mm)
2.1.4 培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)
2.1.5 恒溫培養(yǎng)箱
2.2  儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基的要求
2.2.1  浮游菌采樣器
2.2.1.1 浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器。
2.2.1.2 應(yīng)嚴(yán)格按儀器說明書的要求進(jìn)行操作。
2.2.1.3 采樣器必須按儀器的檢定周期,定期對(duì)儀器作檢定,以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性,檢驗(yàn)項(xiàng)目有:定時(shí)器,轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速,流量計(jì)。
2.2.1.4 每次測(cè)試前應(yīng)先接通電源,啟動(dòng)真空抽氣泵,然后調(diào)節(jié)流量計(jì)和定時(shí)器。
2.2.1.5 空氣采樣量根據(jù)需要選定,已知采樣器的流量(L/min),設(shè)定采樣時(shí)間(min)兩者相乘即得采樣量(L)。
2.2.1.6 采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造,采樣管嚴(yán)禁滲漏,內(nèi)壁應(yīng)光滑,采樣管的長度應(yīng)根據(jù)測(cè)定點(diǎn)的高度定,盡量減少彎曲。
3.測(cè)試方法
3.1  測(cè)試用儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。
3.1.1  采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒劑滅菌。
3.1.2  用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
3.1.3  采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂盤、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面,采樣結(jié)束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。
3.1.4  采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌,如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁、內(nèi)壁進(jìn)行消毒,應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。
3.1.5  采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服,在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前,雙手用消毒劑消毒。
3.2采樣程序
3.2.1  儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿,開動(dòng)真空泵抽氣,使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā),時(shí)間不少于5min,并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
3.2.2  關(guān)閉真空泵,放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣品縫隙高度。
3.2.3  置采樣器于采樣點(diǎn)后,開啟采樣器、轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器,根據(jù)采樣量設(shè)定
采樣時(shí)間。
4.測(cè)試規(guī)則
4.1測(cè)試狀態(tài)
4.1.1浮游菌測(cè)試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過。
4.1.2測(cè)試狀態(tài)為靜態(tài)測(cè)試,并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。
4.2測(cè)試人員
4.2.1測(cè)試人員必須穿戴符和被測(cè)環(huán)境級(jí)別的工作服。
4.2.2靜態(tài)測(cè)試時(shí),室內(nèi)人員不得多于2人。
4.3測(cè)試時(shí)間
4.3.1對(duì)單向流,測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10min后開始。
4.3.2對(duì)非單向流,測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開始。
4.4最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置,最小采樣量,見下表:
4.4.1  工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置離地0.8m~1.5m左右,送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開送風(fēng)面30cm左右;可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。
4.4.2  每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。
4.4.3  對(duì)于單向流或送風(fēng)口,采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向;對(duì)于非單向流,采樣管口向上。
4.4.4  布置采樣點(diǎn)時(shí),至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。
4.4.5  采樣時(shí),測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。
5.培養(yǎng)
取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30~35℃培養(yǎng)48小時(shí)。并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對(duì)照皿。
6.菌落計(jì)數(shù)
6.1 用肉眼直接計(jì)數(shù),然后用5-10倍放大鏡檢查,是否遺漏。
6.2 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重疊,可分辨時(shí),仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù):培養(yǎng)結(jié)束,將上述培養(yǎng)后的平皿取出,逐個(gè)點(diǎn)計(jì)菌落數(shù),必要時(shí)用放大鏡檢查,并記錄。 
7.結(jié)果計(jì)算
7.1 平均菌落數(shù)的計(jì)算見下式:
式中:m 為該房間(或區(qū)域)的平均菌落數(shù);
    m1、m2‥‥‥mn 為該房間(或區(qū)域)各取樣點(diǎn)的菌落數(shù);
   N 為培養(yǎng)皿總數(shù)。
8 結(jié)論
8.1 潔凈室(區(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。

8.2 若某潔凈室(區(qū))的平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn),則必須對(duì)此區(qū)域先行消毒,然后重新測(cè)試兩次,測(cè)試結(jié)果必須合格。

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